{"id":1441,"date":"2010-02-10T08:54:16","date_gmt":"2010-02-10T13:54:16","guid":{"rendered":"https:\/\/vetpraxis.academy\/articles\/?p=1441"},"modified":"2010-02-10T08:54:16","modified_gmt":"2010-02-10T13:54:16","slug":"hematologia-tradicional-y-moderna","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/vetpraxis.academy\/articles\/2010\/02\/10\/hematologia-tradicional-y-moderna\/","title":{"rendered":"Hematolog\u00eda Tradicional y moderna"},"content":{"rendered":"

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Por Juan Manuel Lajara Larrea<\/a>*<\/em><\/p>\n

La hematolog\u00eda veterinaria se ha convertido en los \u00faltimos a\u00f1os en una ciencia que interesa cada d\u00eda m\u00e1s a los m\u00e9dicos veterinarios en nuestro pa\u00eds. Esto se debe por una parte al inter\u00e9s de los profesionales por aprender, a la informaci\u00f3n actualizada que cada d\u00eda se encuentra m\u00e1s al alcance del veterinario y a la importante labor de difusi\u00f3n que realizan los laboratorios fabricantes de equipos automatizados. La intenci\u00f3n de este escrito no es brindar los \u00faltimos avances del campo, sino m\u00e1s bien brindar una revisi\u00f3n y opini\u00f3n muy personal del manejo de la hematolog\u00eda animal. Por otra parte debo dejar en claro que no es mi especialidad la hematolog\u00eda, pero al igual que muchos de ustedes, la uso casi a diario para resolver casos cl\u00ednicos, realizar prequir\u00fargicos, monitorear quimioterapias, entre otros.<\/p>\n

\u00ab…en el conteo leucocitario la posibilidad de llegar y sobrepasar la m\u00e1xima imprecisi\u00f3n permisible deja de ser una posibilidad y se convierte en una realidad.\u00bb<\/p><\/blockquote>\n

Al igual que en todo el mundo, es el hemograma, el examen m\u00e1s solicitado por los veterinarios cl\u00ednicos por las razones antes mencionadas. Considero importante que conozcamos las ventajas y limitaciones de cada procedimiento que nos lleva al resultado cuantitativo de las formas celulares que conforman lo que llamamos sangre.<\/p>\n

Para realizar un hemograma con fines cuantitativos existen hoy en d\u00eda dos grupos que son el an\u00e1lisis tradicional y los sistemas automatizados.<\/p>\n

Se entiende por an\u00e1lisis tradicional a los m\u00e9todos manuales que usan c\u00e1maras de conteo como la Neubauer y pipetas de diluci\u00f3n. En el otro lado, los m\u00e9todos automatizados trabajan bajo tres sistemas: impedancia el\u00e9ctrica, contadores centr\u00edfugos y contadores l\u00e1ser.<\/p>\n

SISTEMAS AUTOMATIZADOS<\/strong><\/p>\n

Los estudios cuantitativos de los componentes celulares de la sangre comprenden el conteo de miles de c\u00e9lulas por cada muestra analizada. Es por esta raz\u00f3n que los sistemas automatizados suelen ser m\u00e1s precisos que los conteos manuales(1). Hasta hace algunos a\u00f1os, los veterinarios est\u00e1bamos forzados a realizar estudios cuantitativos en equipos dise\u00f1ados para medicina humana. Esto produc\u00eda en muchas oportunidades resultados que creaban desconfianza en los cl\u00ednicos veterinarios. Hoy en d\u00eda gracias al acceso a la tecnolog\u00eda, podemos acceder a equipos automatizados dise\u00f1ados especialmente para veterinaria con la consiguiente obtenci\u00f3n de resultados m\u00e1s confiables.<\/p>\n

1. CONTADORES POR IMPEDANCIA EL\u00c9CTRICA<\/strong><\/p>\n

Descrito y usado por Coulter en 1956, el contador de impedancia el\u00e9ctrica trabaja mediante la suspensi\u00f3n de las c\u00e9lulas sangu\u00edneas en un l\u00edquido electr\u00f3nicamente conductor(4). Cada part\u00edcula es forzada a atravesar un par de electrodos produciendo un cambio en la resistencia el\u00e9ctrica entre los electrodos(1). Cada c\u00e9lula produce un pulso el\u00e9ctrico espec\u00edfico que permite su clasificaci\u00f3n y conteo.<\/p>\n

Los equipos de medicina humana que trabajan por impedancia producen resultados cercanos a lo real cuando se analiza sangre canina. En el caso de los felinos la presencia de macroplaquetas suele producir falsas tromocitopenias al ser \u201cconfundidas\u201d por eritrocitos.<\/p>\n

En el caso de los leucocitos, los equipos de impedancia producir\u00e1n un \u00edndice de variaci\u00f3n menor al 5% pero los equipos para humanos deben ser calibrados el\u00e9ctricamente para poder ser usado en conteo diferencial de leucocitos en medicina veterinaria(4).<\/p>\n

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FIG.1. Gr\u00e1fico del sistema de trabajo de los analizadores hematol\u00f3gicos de Impedancia)<\/p>\n

2. CONTADORES CELULARES CENTR\u00cdFUGOS<\/strong><\/p>\n

Tambi\u00e9n llamados analizadores \u201cBuffy Coat\u201d fueron introducidos en los 80\u2019s como herramienta alternativa al conteo tradicional(1). El sistema est\u00e1 basado en la densidad variable de los componentes celulares al ser colocados en un capilar de micro hematocrito y ser sometidos a centrifugaci\u00f3n. Un flotador cil\u00edndrico espec\u00edficamente colocado entre la capa de eritrocitos y el plasma expande en distintas capas de los componentes leucocitarios. Por \u00faltimo, la diferenciaci\u00f3n se logra mediante el uso de reactivos y colorantes (naranja de acridina, oxalato pot\u00e1sico y un anticuerpo monoclonal) que cubren internamente el tubo o capilar)(1).<\/p>\n

Los componentes una vez te\u00f1idos son expuestos a una fuente de luz azul violeta y la fluorescencia permite distinguir los componentes celulares. Los resultados contenidos comprenden hematocrito, hemoglobina, n\u00famero de c\u00e9lulas rojas, n\u00famero de leucocitos, granulocitos totales, neutr\u00f3filos, eosin\u00f3filos y porcentaje de reticulocitos(1).<\/p>\n

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FIG.2-(Uno de los equipos centr\u00edfugos m\u00e1s conocidos en el medio – IDEXX)<\/p>\n

Estos equipos son f\u00e1ciles de usar y son los m\u00e1s accesibles para el uso en perro, gato, caballo y vacuno(1). Los resultados se obtienen en 7 minutos, aunque algunas veces especialmente en gatos, se requiere una segunda centrifugaci\u00f3n de la muestra para producir una adecuada separaci\u00f3n de las capas.(4) Muchos errores pueden ser detectados mediante los gr\u00e1ficos de Buffy Coat que proporciona el equipo. Otras anormalidades como son la microcitosis, hipocromasia o c\u00e9lulas inmaduras invalidan los resultados inmediatamente(4).<\/p>\n

3. CONTADORES LASER O CITOMETR\u00cdA DE FLUJO<\/strong><\/p>\n

El principio de trabajo de estos equipos radica en la dispersi\u00f3n de la luz sobre una c\u00e9lula. Las interrupciones del l\u00e1ser pueden ser usadas para el conteo celular, mientras que los cambios en la refracci\u00f3n de la luz brindan informaci\u00f3n de tama\u00f1o celular o complejidad y densidad interna. Es de esta forma que los equipos l\u00e1ser pueden determinar el recuento de eritrocitos, recuento de leucocitos, concentraci\u00f3n de hemoglobina, distribuci\u00f3n de los eritrocitos, distribuci\u00f3n de la hemoglobina, dos histogramas, citograma eritrocitario, recuento de plaquetas, volumen plaquetar medio, el histograma plaquetario, identifica errores como la agregaci\u00f3n plaquetar.(1)<\/p>\n

Estos equipos pueden llegar a costar hasta $ 200.000.00, por lo que su uso est\u00e1 destinado a motivos educacionales y grandes corporaciones. Su uso en pr\u00e1ctica de animales menores en Latinoam\u00e9rica es muy bajo.<\/p>\n

Ya sea cualquiera de los mencionados sistemas automatizados que estuviera usando, nunca deje de realizar un frotis manual simple para evaluar morfolog\u00eda celular y posibles anormalidades que podr\u00edan alterar los resultados. Si no cuenta con microscopio o sus conocimientos en hematolog\u00eda no son suficientes, remita la l\u00e1mina a un pat\u00f3logo cl\u00ednico, pat\u00f3logo, hemat\u00f3logo o cit\u00f3logo de confianza.<\/p>\n

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FIG.3-(Equipo laser de IDEXX)<\/p>\n

SISTEMA MANUAL<\/strong><\/p>\n

El sistema manual o tradicional de conteo celular es conocido por todos los veterinarios. En este sistema se usan dilutores de leucocitos y de eritrocitos, c\u00e1mara de Neubauer y un microscopio(3). Si bien este sistema se ha usado como referencia por muchos a\u00f1os en el campo veterinario, se debe se\u00f1alar que posee demasiados puntos cr\u00edticos que si no son abordados con la t\u00e9cnica adecuada nos puede brindar resultados lejanos (muy lejanos) a la realidad. El conteo de eritrocitos mediante c\u00e1mara de Neubauer presenta menos probabilidad de error excesivo, por lo que los resultados de un buen examen son bastante aceptables para el manejo del paciente a diferencia del conteo leucocitario que presenta una posibilidad de error aleatorio que excede la cantidad m\u00e1xima de errores aceptable(6). Es por esta raz\u00f3n que muchos autores comparten la idea que es imposible obtener resultados \u00fatiles para la medicina cl\u00ednica.<\/p>\n

Para poder explicar mejor los posibles errores en los conteos leucocitarios se puede usar una f\u00f3rmula matem\u00e1tica de imprecisi\u00f3n anal\u00edtica total (CVTOTAL) que est\u00e1 compuesta por varias fuentes importantes de error como son imprecisi\u00f3n del analizador (CVANALIZER), clasificaci\u00f3n celular inconsistente (CVCLASS), error de muestra estad\u00edstica (CVSAMPLING) y mala preparaci\u00f3n de la muestra (CVPREP). Por lo tanto se presenta:<\/p>\n

CVTOTAL = raiz cuadrada de :CV2ANALIZER + CV2CLASS + CV2SAMPLING + CV2PREP<\/p>\n

El error de la muestra estad\u00edstica es la magnitud o porcentaje de la cantidad real de c\u00e9lulas que hay en la muestra contra la cantidad de c\u00e9lulas contadas. Es conocido que a mayor cantidad de c\u00e9lulas contadas es menor la probabilidad de error, pero en el conteo leucocitario la posibilidad de llegar y sobrepasar la m\u00e1xima imprecisi\u00f3n permisible deja de ser una posibilidad y se convierte en una realidad. S\u00f3lo los conteos de polimorfos neutr\u00f3filos pueden producir resultados que no sobrepasen el l\u00edmite de errores permitidos siempre que se cuenten 500 c\u00e9lulas o m\u00e1s(6). Para los otros tipos celulares presentes en el paquete leucocitario, el conteo de incluso 500 c\u00e9lulas no presenta ninguna garant\u00eda.<\/p>\n

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FIG.4-(Tabla de eritroformas o cambios morfol\u00f3gicos eritrocitarios)<\/p>\n

Luego de esta informaci\u00f3n considero necesario aclarar que no existe m\u00e9todo 100% perfecto para los estudios hematol\u00f3gicos cuantitativos ya que los m\u00e9todos automatizados tambi\u00e9n presentan otros escenarios de posibilidad de error, aunque notablemente menores(6). La tecnolog\u00eda para los estudios hematol\u00f3gicos esta logrando avances importantes y en donde se pueda usar hay que usarla dentro de las posibilidades de cada pr\u00e1ctica profesional.<\/p>\n

ESTUDIO DEL FROTIS SANGU\u00cdNEO<\/strong><\/p>\n

El estudio del frotis sangu\u00edneo es un procedimiento rutinario y fundamental para complementar los estudios cuantitativos de los componentes sangu\u00edneos. Los cambios en la morfolog\u00eda de las c\u00e9lulas sangu\u00edneas nos pueden brindar informaci\u00f3n sobre p\u00e9rdidas masivas de sangre, exposici\u00f3n a toxinas, reacciones inmunomediadas e infecciosas(4).<\/p>\n

El correcto estudio del frotis depende de varios factores entre los que destacamos la adecuada toma de muestra, correcto extendido en monocapa, secado inmediato, buen manejo de las tinciones hematol\u00f3gicas, microscopio binocular con objetivos 10, 40 y 100 (inmersi\u00f3n) en buen estado y personal entrenado para \u00e9ste prop\u00f3sito.<\/p>\n

ANORMALIDADES ERITROCITARIAS<\/strong><\/p>\n

1. FRAGMENTACI\u00d3N<\/strong><\/p>\n

Son c\u00e9lulas que han perdido parte de su membrana celular con o sin p\u00e9rdida de citoplasma. Las causas m\u00e1s comunes suelen ser turbulencias sangu\u00edneas o excesiva precipitaci\u00f3n de fibrina. La excesiva fuerza al realizar los frotis no produce fragmentaciones a diferencia de lo que com\u00fanmente se cree. Entre las patolog\u00edas que presentan fragmentaci\u00f3n frecuente tenemos las estenosis cardiacas al producir turbulencia al interior de la c\u00e1mara cardiaca, problemas espl\u00e9nicos (hemangiosarcoma) debido al largo tiempo de tr\u00e1nsito de los eritrocitos a trav\u00e9s de capilares con circuitos an\u00f3malos, filariasis cardiaca y coagulaci\u00f3n intravascular diseminada.(2)<\/p>\n

2. CAMBIOS OXIDATIVOS<\/strong><\/p>\n

Los cambios oxidativos ocasionan desnaturalizaci\u00f3n de la hemoglobina por toxinas end\u00f3genas o ex\u00f3genas. Los eritrocitos con cambios oxidativos adoptan formas en \u201cnariz de payaso\u201d que se llaman cuerpos de Heinz. Usando tinciones hematol\u00f3gicas rutinarias (Diff Quick, Tinci\u00f3n 15, Hemacolor) se observan como una \u00fanica proyecci\u00f3n de la membrana citoplasm\u00e1tica con una zona p\u00e1lida que la rodea(1). Los cuerpos de Heinz se ti\u00f1en de azul cuando se usa Nuevo Azul de Metileno como tinci\u00f3n permitiendo su reconocimiento inmediato. Entre las causas m\u00e1s comunes de cambios oxidativos en los eritrocitos tenemos la intoxicaci\u00f3n por cebolla, acetominofen, paracetamol y naftalina(1). Entre las causas end\u00f3genas se observan la diabetes mellitus, linfomas, enfermedad renal cr\u00f3nica.<\/p>\n

Los leucocitos presentan igualmente cambios t\u00f3xicos como son la multinucleaci\u00f3n y degeneraci\u00f3n nuclear.<\/p>\n

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FIG.5-(Cuerpos de Heinz te\u00f1idos con Nuevo Azul de Metileno)<\/p>\n

3. CUERPOS DE HOWELL \u2013 JOLLY<\/strong><\/p>\n

Los cuerpos de Howell \u2013 Jolly son remanentes nucleares en el citoplasma de los eritrocitos. Son basof\u00edlicos (azulados) y esf\u00e9ricos. Se pueden observar durante la producci\u00f3n excesiva de eritrocitos y luego de esplenectom\u00edas.<\/p>\n

4. ANISOCITOSIS<\/strong><\/p>\n

Se refiere al hallazgo de eritrocitos de distintos tama\u00f1os en un mismo campo de observaci\u00f3n. La anisocitosis leve puede ser hallada en perros y gatos saludables. En anemias regenerativas, autoinmunes, hemol\u00edticas, por cuerpos de Heinz y variaci\u00f3n racial.<\/p>\n

5. MICROCITOSIS Y MACROCITOSIS<\/strong><\/p>\n

La microcitosis es el hallazgo de eritrocitos m\u00e1s peque\u00f1os de lo normal (7micras) y la macrocitosis es el hallazgo de lo opuesto, c\u00e9lulas m\u00e1s grandes.<\/p>\n

Existen muchos m\u00e1s conceptos y clasificaciones de anormalidades encontradas en el hemograma que podemos discutir.<\/p>\n

* Juan Manuel Lajara Larrea.
\nCl\u00ednica Veterianaria Royal Pets \u2013 Laboratorio Patol\u00f3gico Veterinario San Isidro. Lima – \u00a0Per\u00fa.
\nVia: https:\/\/laboratoriosanisidro.blogspot.com\/<\/em><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

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